氨基酸分析儀是一種用于測定食品、飼料、生物樣品等中氨基酸含量的儀器,自動進樣器支持多樣品連續分析(如1500 μL樣品瓶),部分型號可實現柱前衍生自動化;檢測模塊:茚三酮衍生法為主,搭配紫外/可見光檢測器;新型儀器可能采用積分脈沖安培檢測器,提升靈敏度;數據處理系統:實時記錄色譜峰并計算濃度,支持保留時間重現性(CV<0.3)和峰面積精度(CV<1.0)。
氨基酸分析儀的測定步驟:
1.樣品處理:
-游離氨基酸測定:若測定樣品中各種游離氨基酸含量,需先除去脂肪雜質,然后直接上柱進行分析。
-蛋白質氨基酸組成測定:若測定蛋白質的氨基酸組成,樣品必須經酸水解,使蛋白質變成氨基酸后,再上柱進行分析。一般使用6mol/L的鹽酸,在110℃左右水解22-24小時,水解后需將水解液過濾、定容。
2.上柱分析:
-將處理好的樣品上柱,上柱的樣品量根據所用自動分析儀的靈敏度來確定,一般為每種氨基酸0.1μmol左右(水解樣品干重為0.3mg左右)。
3.洗脫與分離:
-開啟儀器,設定好洗脫液的流速、溫度等參數,使樣品中的氨基酸在離子交換柱中進行分離。不同的氨基酸在離子交換柱中的吸附和洗脫能力不同,從而實現分離。
4.衍生反應:
-氨基酸從離子交換柱中洗脫出來后,與茚三酮溶液發生顏色反應,生成紫色或黃色的化合物。
5.比色測定:
-在特定的波長下,對生成的化合物進行比色測定。一般來說,紫色物質在570nm波長下進行比色測定,黃色化合物在440nm波長下進行比色測定。
6.數據處理:
-儀器會根據比色測定的結果,自動計算出樣品中各種氨基酸的含量,并給出相應的數據報告。
氨基酸分析儀的選擇與維護要點:
1.儀器選型:根據檢測需求選擇陽離子交換(常規分析)或陰離子交換系統(無需衍生),關注檢出限、通量和自動化水平。
2.日常維護:定期清洗色譜柱、校準檢測器,避免緩沖液沉淀堵塞流路;使用脫氣裝置防止氣泡影響分離效果。